準(zhǔn)確稱(chēng)量：精確稱(chēng)取瓊脂糖或聚丙烯酰胺等凝膠原料，以及緩沖液、添加劑等試劑，確保試劑用量準(zhǔn)確，以保證凝膠的濃度和性能符合實(shí)驗(yàn)要求。

檢查試劑質(zhì)量：使用前檢查試劑的外觀、保質(zhì)期等，如瓊脂糖應(yīng)無(wú)結(jié)塊、變色等現(xiàn)象，避免使用變質(zhì)或受污染的試劑，以免影響凝膠的凝固和電泳效果。

充分溶解：將瓊脂糖或聚丙烯酰胺加入到適量的緩沖液中，加熱攪拌使其充分溶解。加熱過(guò)程中要不斷攪拌，防止局部過(guò)熱導(dǎo)致試劑燒焦或溶液暴沸，確保凝膠溶液均勻一致。

避免過(guò)度加熱：溶解瓊脂糖時(shí)，加熱至溶液澄清透明即可，過(guò)度加熱可能會(huì)破壞瓊脂糖的結(jié)構(gòu)，影響凝膠的凝固性能和分辨率。

添加添加劑：如需添加溴化乙錠（EB）等染色劑或其他添加劑，應(yīng)在凝膠溶液冷卻至適當(dāng)溫度后再加入，并充分混勻，避免因加入過(guò)早導(dǎo)致染色劑失效或因攪拌不勻造成染色不均。

清潔干燥：使用前將電泳槽和梳子等模具洗凈并擦干，避免殘留的雜質(zhì)或水分影響凝膠的凝固和與模具的貼合度。

正確安裝：將模具組裝好，確保密封良好，防止凝膠溶液泄漏。對(duì)于一些可拆卸的模具，要注意各部件的安裝順序和緊密程度。

放置梳子：將梳子垂直插入模具的相應(yīng)位置，確保梳子的齒與模具底部保持適當(dāng)?shù)木嚯x，一般為 1 - 2 mm，以形成合適深度的加樣孔。同時(shí)，要保證梳子放置水平，避免加樣孔出現(xiàn)傾斜或大小不一的情況。

控制溫度：將冷卻至約 50 - 60℃的凝膠溶液緩慢倒入模具中。溫度過(guò)高可能會(huì)燙傷手指，且會(huì)使模具變形；溫度過(guò)低則凝膠可能在倒出前就開(kāi)始凝固，導(dǎo)致灌注不均勻。

避免氣泡：傾倒凝膠溶液時(shí)，應(yīng)沿著模具的一側(cè)緩慢倒入，盡量避免產(chǎn)生氣泡。如果有氣泡產(chǎn)生，可以用玻璃棒或移液器輕輕將其趕出，以免影響凝膠的質(zhì)量和電泳結(jié)果。

一次灌注完成：盡量一次性將凝膠溶液灌注到模具中，避免多次添加導(dǎo)致凝膠分層或不均勻。如果需要制作較厚的凝膠，可以分多次灌注，但每次灌注的時(shí)間間隔不宜過(guò)長(zhǎng)，以免先灌注的部分凝固。

自然冷卻：讓凝膠在室溫下自然冷卻凝固，不要人為加速冷卻過(guò)程，如放入冰箱或用風(fēng)扇吹，否則可能導(dǎo)致凝膠收縮不均勻，產(chǎn)生應(yīng)力，影響電泳時(shí)的分離效果。

避免震動(dòng)：在凝膠凝固過(guò)程中，要保持模具靜止，避免震動(dòng)或移動(dòng)，以免破壞凝膠的結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致加樣孔變形或凝膠出現(xiàn)裂縫。

檢查凝固情況：一般凝膠在室溫下放置 30 - 60 分鐘即可凝固?？梢酝ㄟ^(guò)觀察凝膠表面是否平整、透明，以及用手指輕輕觸摸凝膠邊緣是否有粘性來(lái)判斷凝膠是否凝固。